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怎么樣提升CY5/CY5.5熒光成像效果之光源
來源:客戶案例    發(fā)布時間:2023/11/6 9:43:45

如何提升CY5/CY5.5熒光成像效果之光源篇

提升CY5/CY5.5的熒光成像效果,通常是從以下四個維度做出改進,1.攝像頭;2.熒光光源;3.熒光濾色片組;4.熒光物鏡。在上一期的文章中,我們已經(jīng)分享過如何從攝像頭挑選角度提升CY5/CY5.5的成像效果,今天我們繼續(xù)講第二個維度,熒光光源。

光源如何影響CY5/CY5.5的成像效果?

CY5染料的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜

熒光光源在熒光成像中的作用是激發(fā)熒光染料,要討論如何更好地激發(fā)熒光,就要先從熒光染料的光譜特性說起。我們看到的很多資料都會寫著熒光染料的激發(fā)波長和發(fā)射波長,這兩個數(shù)值都是峰值數(shù)值,以便描述,在峰值附近其實還有一定的范圍會有激發(fā)和發(fā)射,只是這些波段的熒光效率相對低,效果沒那么好。

理想的熒光光源,一需要光譜覆蓋熒光染料的峰值激發(fā)波長,二需要在這個波長有較高的光強,這樣才能獲得更好的激發(fā)效果,對于CY5來說這個數(shù)值大概在650nm左右,而CY5.5則在670nm左右。

02_LED.jpg

汞燈光源的光譜分布

CY5/CY5.5成像效果不好,一個典型原因是常見的汞燈熒光光源并不適合CY5/CY5.5成像。通過汞燈光源的光譜圖,我們可以看到,汞燈600nm后的光譜沒有波峰,光強是比較弱的,因此理論上激發(fā)效果不會好。

03_LED.jpg

汞燈實測的CY5成像光功率

而在實測中,汞燈光源在CY5波段的光功率也很明顯低于其他波段,還不到DAPI或GFP波段光功率的一半。

·傳統(tǒng)熱光源哪個更適合CY5/CY5.5成像?

傳統(tǒng)熱光源光譜特性對比

汞燈不是合適的CY5/CY5.5熒光光源,那么傳統(tǒng)熱光源中哪一個比較合適呢?這里對比四種傳統(tǒng)熱光源的光譜特性,其中鹵鎢燈為了方便在圖上呈現(xiàn),呈現(xiàn)的數(shù)值是在實際數(shù)值基礎(chǔ)上做了10倍放大,也就是說,雖然鹵鎢燈優(yōu)勢光譜集中在600nm后的區(qū)域,但光強太低,并不適合做熒光光源。

氙燈實測的CY5成像光功率

氙燈是傳統(tǒng)熱光源中更適合CY5/CY5.5的選擇,它跟汞燈都屬于高壓弧燈,穩(wěn)定性比汞燈好,壽命可以到1000-2000小時,有著近似太陽的連續(xù)光譜、均勻光強,實測CY5的激發(fā)光功率大約可以到汞燈的2倍,但同時功率要到汞燈的1.5倍,且發(fā)熱大,另外DAPI波長的激發(fā)效果也比較差。

·更值得推薦的CY5/CY5.5激發(fā)光源:LED熒光光源

CY5.jpg

LED熒光光源激發(fā)的CY5

傳統(tǒng)熱光源用于CY5/CY5.5成像有其局限性,目前成像效果比較好的有兩種光源,一種是搭配共聚焦/全內(nèi)反射使用的激光光源,一種是適合普通熒光顯微鏡的LED熒光光源。LED熒光光源是更適合大部分用戶的選擇。

四通道光源MG-120的部分可選光譜

四通道光源MG-120可以按需配置4個LED熒光通道,每個通道獨立控制、獨立記憶光強,通過選配R波段激發(fā)配置,可以實現(xiàn)汞燈3-5倍的CY5/CY5.5激發(fā)效果,優(yōu)于氙燈,同時DAPI激發(fā)效果也優(yōu)于氙燈,更能全面滿足各種熒光染料激發(fā)需求。

MG-120壽命更長,效果更好


此外,基于LED技術(shù)的MG-120作為熒光光源,不僅相比汞燈和氙燈熒光光源功耗低、發(fā)熱小、光強可調(diào)節(jié),其使用壽命也可以達(dá)到5萬小時,遠(yuǎn)勝于汞燈和氙燈,大大降低了設(shè)備維護的人力成本和時間成本,讓實驗室得以更高效運行。

熒光光源對比


汞燈

氙燈

四通道光源MG-120

功耗

100W

150W

72W

發(fā)熱

高溫燙手

高溫燙手

安全溫度

壽命

200小時

1000-2000小時

50000小時

光強

不可調(diào)

不可調(diào)

可調(diào)

需要預(yù)熱

不需要

CY5激發(fā)

一般

DAPI激發(fā)


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來源:https://www.mshot.com/article/1864.html

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